Катуаба: ценные свойства, состав, польза дерева Trichilia catigua (catuaba) – 2 часть

Анализ фитохимических характеристик катуабы, продолжение: 

Ванилин взаимодействовал с флаванолами и образовывал красный аддукт (субстанцию). А при реакции с хлоридом железа на ТСХ (тонкослойной хроматографии) проявлялся коричневато-серый цвет. Оба изменения характерные для флавана-3-олов. Наличие этих компонентов подтверждается показателями ультрафиолетовых спектров составляющих при максимальном излучении в 278 нм в процессе проведения анализа HPLC-DAD (ВЭЖХ-ДАД).

 

В таблице 1 приведены данные масс-спектрометрии (МС), полученные при проведении анализа ВЭЖХ-ESI-MS / MS экстрактов на основе гексана, хлороформа, водно-спиртового и водного экстрактов из коры Trichilia catigua. Масс-спектральные данные, полученные с помощью тандемной масс-спектрометрии высокого разрешения, описаны в обсуждениях.

 

Идентифицировать компоненты удалось благодаря полученным MS данным, и с учетом данных о MS, которые были выявлены ранее несколькими авторами при исследовании похожих видов. Подробности описаны в обсуждениях. Как видно по табл. 1, в четырех экстрактах, включая экстракты аполярного гексана и хлороформа, были обнаружены цинхонан IIa (4), цинхонан Ia (7) и cinchonain Ib (12). Апоцинин E (5), глюкозид цинкхонаина IIa (9) и глюкозид цинхонаина IIb (10) были обнаружены только в экстракте на основе хлороформа. Тогда как процианидин B2-8-C-рамнозид (2) и процианидин B2 – (эпи) -катехин – ( эпи) -катехин (3) были обнаружены только в водно-спиртовом экстракте. В водном экстракте были обнаружены те же составляющие, которые содержатся в водно-спиртовом экстракте, кроме процианидинов. Спектры ВЭЖХ-ESI-MS / MS компонентов 1-12 представлены в виде дополнительного файла 1.

Таблица 1

 

Отчет о MS-данных, полученных при анализе экстрактов на основе гексана (HEX), хлороформа (CLO), водно-спиртового (HA) и водного (AQ) экстрактов из коры Trichilia catigua с помощью HPLC-DAD-ESI-MS / MS

Компонент

Регистируемое время

Показатели масс-спектометрии и соотношение массы к заряду на пике фрагментации

Предполагаемая структура

Экстракт на основе гексана

Экстракт на основе хлороформа

Водно-спиртовой

Водный

1

4.0

[M – H]? – 341
MS/MS – 179

6-O-кофеоил глюкозид

X

X

X

2

14.1

[M – H]? – 723
MS/MS – 597 (20), 433 (80) 425 (90), 407 (100), 289 (20)

процианидин B2–8-C-рамнозид

X

3

15.3

[M – H]? – 577
MS/MS – 559 (20), 451 (30), 425 (100), 407 (80), 289 (20)

процианидин В2 (эпи) -катехин – (эпи) -катехин

X

4

17.2

[M – H]? – 739
MS/MS – 587 (100), 451 (40)

цинхонаин IIa

X

X

X

X

5

18.0

[M – H]? – 467
MS/MS – 449

апоцинин Е

X

6

19.0

[M – H]? – 353
MS/MS – 191

3-О-кафеоилхиновая кислота

X

7

19.6

[M – H]? – 451
MS/MS – 341

цинхонаин Ia

X

X

X

X

8

21.4

[M – H]? – 613
MS/MS – 503 (100), 451 (50), 393 (20), 341 (20)

бис- (3,4-дигидроксифенилпропаноид) -замещенный катехин

X

X

X

9

22.2

[M – H]? – 901
MS/MS – 791 (100), 597 (70), 451 (60), 341 (20)

цинхонаин IIa глюкозид

X

10

24.4

[M – H]? – 901
MS/MS – 791 (60), 597 (100), 451 (40), 341 (50)

цинхонаин IIb глюкозид

X

11

24.8

[M – H]? – 613
MS/MS – 503 (100), 451 (10), 341 (10)

цинхонаин Id-7- глюкозид

X

X

12

26.4

[M – H]? – 451
MS/MS – 341

цинхонаин Ib

X

X

X

X

Анализ DPPH

Активность накопления DPPH при введении четырех экстрактов T. catigua (таблица 2). Наиболее сильный эффект был обнаружен при введении водно-спиртового экстракта (EC50= 43 мкг / мл). Его показатели были подобными к показателям рутина, который использовался в тестах как контрольный образец.

Таблица 2

Уровень накопления радикалов DPPH и угнетения выделения радикалов ацетилхолинэстеразы при введении разных экстрактов Trichilia catigua

Экстракты и контрольные образцы

Уровень накопления радикала
EC50 в DPPH (мкг/мл)

Уровень угнетения выделения радикала IC50 в ацетилхолинэстеразе AChE (мкг/мл)

Экстракт на основе гексана

53 (28–136)

346 (270–502)

Экстракт на основе хлороформа

60 (35–145)

313 (193–1128)

Водно-спиртовой экстракт

43 (7–210)

142 (112–196)

Водный экстракт

52 (24–150)

315 (230–527)

Рутин

44 (9–216)

Ривастигмин

18 (0–136)

Стабильный уровень EC50, IC50 и 95% предельных уровней (в скобках) рассчитывали линейной регрессией, используя средние показатели при проведении анализа 3-4 раза для каждого экстракта.

Активность ацетилхолинэстеразы

 

Экстракты T. catigua показали ингибирующую активность радикалов AChE in vitro, причем водно-спиртовой экстракт был наиболее эффективным для радикала IC50= 142 мкг / мл (таблица 2). Показатели ривастигмина, контрольного образца, были IC50= 18 мкг / мл.

 

Двигательная активность

 

Спонтанное введение мышам водно-спиртового экстракта T. catigua (50 и 500 мкг / кг, м.т.) не влияло на уровень двигательной активности (p> 0,05) в течение 120 минут наблюдения (схема 1). В тех же условиях и дозах такое введение не влияло на координацию движений на ротароде (p> 0,05, дополнительный файл 2). Это свидетельствует о том, что экстракт в таких дозах не нарушает двигательную активность животных.

 

 

Схема 1

Спонтанная двигательная активность мышей, которым систематически вводили водно-спиртовой экстракт Trichilia catigua (катуабе) в дозах 50 и 500 мкг / кг (перорально). Столбцы обозначают средние показатели ± SEM (к = 10), полученные путем проведения ANOVA (двухфакторного дисперсионного анализа).

 

Стресс при иммобилизации и охлаждении

При иммобилизации и охлаждении повышался уровень индуцирования АКТГ (3,35) = 40,05; p <0,001 3=”” 35=”” 103=”” 81=”” p=”” 0=”” 001=”” 8=”” 10=”” 22=”” 11=”” 7=”” 29=”” 30=”” 02=”” t=”” catigua=”” 25=”” 250=”” 05=”” span=””>

 

Таблица 3

Эффект от введения крысам водно-спиртового экстракта Trichilia catigua (TC) (25 и 250 мкг / кг, м.т.) на протяжении 14 дней: степень и индекс изъязвления, вызванного стрессом; вес надпочечников, тимуса и селезенки; уровень АКТГ и кортикостерона. За основу взяты средние показатели ± SEM (к = 9-10)

 

 

Группа

Степень изъязвления

Индекс изъязвления

Вес надпочечников(мг)

Вес тимуса (мг)

Вес селезенки (мг)

Уровень АКТГ (пг/мл)

Уровень кортикостерона (мкг/дл)

Контрольная группа

3.2 ± 0.3

15.3 ± 3.1

54.4 ± 3.8

326.8 ± 21.1

809.8 ± 48.3

812 ± 31

980 ± 62

Те, которых не тестировали

0.3 ± 0.2*

0.6 ± 0.3*

52.8 ± 2.6

434.2 ± 22.9*

1470.1 ± 72.6*

71 ± 27*

88 ± 35*

Водно-спиртовой экстракт 25 мкг/кг

3.7 ± 0.4#

19.4 ± 4.4#

60.1 ± 2.0

286.0 ± 29.0#

840.6 ± 49.5#

735 ± 70#

1012 ± 44#

Водно-спиртовой экстракт 250 мкг/кг

3.3 ± 0.4#

13.2 ± 2.3#

62.3 ± 2.7#

301.3 ± 26.4#

791.3 ± 66.0#

833 ± 84#

1080 ± 40#

 

(*) p <0,05 -=”” p=”” 0=”” 05:=”” anova=”” span=””>двухфакторного дисперсионного анализа) и последующей проверкой ретроспективным анализом Duncan.

Принудительные упражнения на беговой дорожке

Мышей принудительно заставляли заниматься физической активностью на беговой дорожке до начала эксперимента и спустя 21 и 49 дней (3-я и 7-я неделя) с момента начала введения водно-спиртового экстракта T. catigua. Различий во времени появления признаков усталости не было среди подопытных всех групп (p> 0,05) на трех временных этапах (схема 2а). А уровень лактата в плазме после тренировки был увеличен только у подопытных, которые принудительно занимались бегом (4,40) = 9,05; p <0,001 21=”” -=”” 2b=”” span=””>

 

Схема 2

 

А – появления признаков усталости (минимальное время), В – уровень лактата в плазме, С – спонтанная двигательная активность мышей, которым вводили водно-спиртовой экстракт Trichilia catigua (TC) (25, 100 и 250 мкг / кг, перорально) и принудительно заставляли заниматься физической активностью на беговой дорожке. Колонки и столбцы обозначают средние показатели ± SEM (к = 8-10). (*) p <0,05: span=””> изменение статистических показателей групп, которые тестировались; (#) p <0,05 span=””> изменения статистических данных контрольной группы. Результаты были определены путем проведения ANOVA (двухфакторного дисперсионного анализа), и последующей проверкой ретроспективным анализом Duncan.

 

Спонтанная двигательная активность мышей контрольной группы (которую не подвергали принудительным упражнениям) была выше, чем у подопытных других групп, при тестировании, проведенном на 21 день с момента начала введения водно-спиртового экстракта (4,40) = 10,65; p <0,001. 49=”” 4=”” 39=”” 1=”” 09=”” p=””> 0,05. С другой стороны, показатели группы, получавшей 250 мкг / кг экстракта T. Catigua отличались от показателей фокус-группы (подопытные которой принудительно занимались упражнениями) на 21 день. У них была повышенная двигательная активность (p <0,05) 2c=”” span=””>

 

Оценка мышечной силы сцепления после переутомления показывает, что между группами (p> 0,05) не было различий в показателях на 21 и 49 день с момента начала введения водно-спиртового экстракта (схема 3а). Разница в силе сцепления до и после упражнений также не была выявлена (схема 3b). С другой стороны, когда мы сравнивали результаты после упражнений в разные моменты времени, мы наблюдали, что показатели подопытных группы, которой вводили T. catigua в дозе 250 мкг / кг были выше (3,30) = 3,61; p <0,05, 49=”” 49-=”” 3c=”” –0=”” 05=”” –=””>

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *

Рекомендуем прочитать

Масло Орегано: широкий спектр применения. Часть 1
Кратом в медицине – применение, польза, эффекты, отзывы
Масло Орегано: широкий спектр применения. Часть 2
Кратом – средство от депрессии
Окунуться в мир этнических чаёв с помощью Guarana.in.ua